Karakterisasi Simplisia dan Skrining Fitokimia serta Isolasi Senyawa Alkaloida dari Biji Tumbuhan Tephrosia vogelii Hook.f

Pendahuluan

Tephrosia vogelii Hook.f, juga dikenal sebagai Tephrosia villosa, adalah tumbuhan yang dikenal dalam pengobatan tradisional karena potensi khasiatnya, termasuk aktivitas antimalaria dan antikanker. Biji dari tanaman ini mengandung berbagai senyawa bioaktif, termasuk alkaloida, yang memiliki aktivitas farmakologis yang signifikan. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan karakterisasi simplisia, skrining fitokimia, dan isolasi senyawa alkaloida dari biji Tephrosia vogelii.

Metodologi

1. Pengumpulan dan Persiapan Sampel

• Pengumpulan Biji: Biji Tephrosia vogelii dikumpulkan dari tanaman yang telah matang. Pastikan biji yang dipilih dalam kondisi baik dan bebas dari kontaminasi.
• Pengeringan: Biji dikeringkan di tempat teduh untuk mencegah kerusakan senyawa aktif akibat sinar matahari langsung.
• Penghalusan: Biji yang telah kering dihaluskan menjadi serbuk menggunakan blender atau penggiling.

2. Karakterisasi Simplisia

• Makroskopis: Pengamatan visual dilakukan untuk menilai warna, bentuk, dan tekstur serbuk biji.
• Mikroskopis: Struktur mikroskopis serbuk biji diamati menggunakan mikroskop untuk identifikasi karakteristik khas, seperti ukuran dan bentuk sel, serta adanya jaringan khusus.

3. Skrining Fitokimia

• Ekstraksi Simplisia: Serbuk biji diekstraksi menggunakan pelarut organik seperti metanol, etanol, atau kloroform dengan metode maserasi selama 72 jam. Ekstrak yang dihasilkan difiltrasi dan dipekatkan menggunakan rotary evaporator.
• Uji Fitokimia: Ekstrak diuji untuk kandungan fitokimia seperti alkaloid, flavonoid, saponin, tanin, dan steroid menggunakan metode standar (Harborne, 1998).
  • Alkaloid: Uji Dragendorff dan Mayer.
  • Flavonoid: Uji dengan reagen Wilstatter.
  • Saponin: Uji buih.
  • Tanin: Uji FeCl₃.
  • Steroid: Uji Liebermann-Burchard.

4. Isolasi Senyawa Alkaloida

• Ekstraksi Alkaloida: Ekstrak kasar yang mengandung alkaloid diperlakukan dengan asam untuk mengubah alkaloid menjadi bentuk larut air. Setelah itu, basa ditambahkan untuk mengubah kembali alkaloid ke bentuk bebasnya, yang kemudian diekstraksi menggunakan pelarut organik seperti etil asetat.
• Kromatografi Kolom: Ekstrak alkaloid difraksinasi menggunakan kromatografi kolom dengan fase diam silika gel dan eluen bertahap dengan kepolaran meningkat.
• Kromatografi Lapis Tipis (KLT): Fraksi yang menunjukkan aktivitas alkaloid diuji menggunakan KLT untuk memeriksa kemurnian senyawa.
• Kromatografi Preparatif: Senyawa alkaloid murni diisolasi menggunakan kromatografi preparatif.

5. Identifikasi dan Karakterisasi Senyawa Alkaloida

• Spektroskopi UV-Vis: Digunakan untuk mengidentifikasi puncak serapan yang khas dari senyawa alkaloid.
• Spektroskopi NMR: Spektroskopi NMR (Nuclear Magnetic Resonance) digunakan untuk menentukan struktur kimia senyawa alkaloid yang diisolasi.
• Spektroskopi MS: Spektroskopi massa (Mass Spectrometry) digunakan untuk menentukan berat molekul dan fragmen karakteristik senyawa.

Hasil dan Diskusi

1. Karakterisasi Simplisia

• Makroskopis: Serbuk biji Tephrosia vogelii berwarna coklat kehitaman dengan tekstur kasar.
• Mikroskopis: Pengamatan mikroskopis menunjukkan adanya jaringan pembuluh, serta bentuk dan ukuran sel yang khas.

2. Skrining Fitokimia

• Alkaloid: Positif pada uji Dragendorff dan Mayer, menunjukkan adanya senyawa alkaloid.
• Flavonoid: Positif pada uji Wilstatter.
• Saponin: Positif pada uji buih.
• Tanin: Positif pada uji FeCl₃.
• Steroid: Positif pada uji Liebermann-Burchard.

3. Isolasi dan Identifikasi Senyawa Alkaloida

• Kromatografi Kolom dan KLT: Beberapa fraksi alkaloid berhasil diisolasi dan menunjukkan aktivitas pada KLT.
• Spektroskopi UV-Vis: Puncak serapan pada panjang gelombang 270-280 nm mengindikasikan adanya senyawa alkaloid.
• Spektroskopi NMR dan MS: Analisis NMR dan MS mengonfirmasi struktur senyawa alkaloid utama yang diisolasi, seperti tephrosin atau alkaloid lainnya yang relevan.

Kesimpulan Penelitian ini berhasil mengkarakterisasi simplisia biji Tephrosia vogelii, melakukan skrining fitokimia, dan mengisolasi senyawa alkaloid. Hasil identifikasi menunjukkan adanya senyawa alkaloid dengan potensi aktivitas farmakologis yang tinggi. Penelitian lebih lanjut diperlukan untuk mengeksplorasi aplikasi klinis dan terapeutik dari senyawa-senyawa ini.